串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)以來，便以其高通量、高靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性高、低檢測限、樣本用量少且前處理簡單、檢測速度快、費用相對低廉等優(yōu)勢顯示出巨大的生命力，與氣相、液相色譜儀的聯(lián)用極大的擴(kuò)展了質(zhì)譜技術(shù)在臨床檢驗中的分析范圍，使其在國際上迅速應(yīng)用于生物學(xué)及醫(yī)藥學(xué)等領(lǐng)域。目前串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)已經(jīng)在遺傳代謝性疾病檢測、臨床免疫學(xué)檢測、微生物檢測、微量元素/微量營養(yǎng)素檢測、糖化血紅蛋白檢測、激素水平檢測、血藥濃度監(jiān)測和藥物代謝研究、蛋白質(zhì)組學(xué)和核苷酸多態(tài)性研究等多種領(lǐng)域開展應(yīng)用。

一、臨床串聯(lián)質(zhì)譜儀基本結(jié)構(gòu)

（一）進(jìn)行質(zhì)譜分析的儀器稱作質(zhì)譜儀。通過上述對質(zhì)譜分離原理的了解，可以知道質(zhì)譜儀雖然有許多不同的設(shè)計，但都是由實現(xiàn)如下基本功能的結(jié)構(gòu)組成： 

1.將樣品分子生成離子（離子源）； 

2.按照m/z的大小對離子進(jìn)行分離（質(zhì)量分析器）； 

3.對選定的離子進(jìn)行破碎并在下一個質(zhì)量分析器重再進(jìn)行分析（串聯(lián)質(zhì)譜具有的功能）；       

4.將分離后的離子轉(zhuǎn)變成電信號并測量其豐度（檢測器）；       

5.處理信號、顯示結(jié)果、控制儀器（電腦）。 

（二）離子源： 

多種離子化技術(shù)可被使用在質(zhì)譜儀中，針對被分析物的性質(zhì)和考慮到離子化過程中內(nèi)部能量的傳遞可選擇不同的離子化技術(shù)。例如電子電離、化學(xué)電離、場電離僅適用于易揮發(fā)、熱穩(wěn)定的化合物；對于熱不穩(wěn)定及不易揮發(fā)的化合物就需要能直接將這些化合物提取到氣態(tài)的方法。這種直接的離子源有兩類：液相離子源和固相離子源。在液相離子源中被分析物是處于溶液中，需將溶液霧化并在大氣壓中中形成離子，然后在真空的作用下迫使離子進(jìn)入分析器，這類離子源有電噴霧（Electro-spray，ESI）、大氣壓中化學(xué)電離（Atmospheric pressure chemical ionization，APCI）等。在固相離子源中，被分析物處于不揮發(fā)的沉積狀態(tài)，這種沉積狀態(tài)可由各種制備方法產(chǎn)生，其制備過程經(jīng)常會涉及引入一種固體或非揮發(fā)性液體做為基質(zhì)，被分析化合物的沉積隨后經(jīng)高能粒子或光子照射使沉積物表面的離子釋放出來并在電場的作用下進(jìn)入分析器，這類離子源有基質(zhì)輔助激光解析（Matrix-assisted laser desorption）、等離子體解析(Plasma desorption)離子源等。 

（三）質(zhì)量分析器：

質(zhì)量分析器可由不同的原理發(fā)展而成。大致而言它們可以分為兩類，一類是以時間的尺度將不同質(zhì)荷比的離子進(jìn)行分離，例如四級桿質(zhì)譜；另一類則是以空間的尺度將不同質(zhì)荷比的離子進(jìn)行分離，例如離子阱質(zhì)譜。當(dāng)然分類也可以用質(zhì)量分析器的其他性質(zhì)，比如脈沖式的或是連續(xù)式的等等。隨著儀器的發(fā)展，也出現(xiàn)許多將不同的質(zhì)量分析器聯(lián)用的組合，例如四級桿-飛行時間（Quadrupole-TOF）等。當(dāng)評價一臺質(zhì)譜儀的性能，一般會考慮到以下這些因素：可分析的質(zhì)量區(qū)間、分析速度、傳送能力（進(jìn)入分析器與到達(dá)檢測器離子的比例）、質(zhì)量準(zhǔn)確度和分辨度。表一列出了某些常用質(zhì)量分析器的基本特征。

質(zhì)量分析器的某些基本特征

兩個或數(shù)個質(zhì)量分析器可被串聯(lián)起來使用，使得在前級質(zhì)量分析器中的選定碎片在后一級質(zhì)譜中得到進(jìn)一步分析，這樣的質(zhì)譜被稱為串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS或MSn）。也可以將色譜（氣相或液相）連接在離子源的前端做為樣品的輸入裝置，使得色譜的分離能力與質(zhì)譜的分離鑒定能力得到疊加，被稱為色質(zhì)聯(lián)用（GC-MS或LC-MS）,聯(lián)用的質(zhì)譜部分自然也可以是串聯(lián)質(zhì)譜。目前臨床實驗室中最常用的質(zhì)譜就是液相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS/MS）。 

（四）檢測器和電腦：

檢測器的作用在于使通過質(zhì)量分析器的離子產(chǎn)生電信號（電流），此電流的強(qiáng)度與其豐度成比例。對離子的測定無非總是根據(jù)其電荷、質(zhì)量或是速率。由于在每個特定時間點上由質(zhì)量分析器中出來的離子有限，其所形成的電流也十分有限，因此其后部都連有放大電路。檢測器與質(zhì)譜的其他部件一樣仍處于不斷發(fā)展之中以應(yīng)對新的需求，例如測定質(zhì)量很大的離子。 

      電腦在質(zhì)譜分析中的基本作用與許多分析儀器基本相同，主要有三個功能：控制儀器、獲取和加工分析資料集對數(shù)據(jù)進(jìn)行解讀，從而最后向用戶輸出一份分析結(jié)果的報告。這其中涉及到模數(shù)信號的轉(zhuǎn)換、分析過程中的取樣頻率與分析質(zhì)量的關(guān)系，用戶也應(yīng)該對所用數(shù)據(jù)庫的特點有所了解，以便對電腦給出的分析結(jié)果有正確的解讀。

二、臨床串聯(lián)質(zhì)譜儀工作原理

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法定量是將含有穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的沉淀劑溶液對血漿樣本進(jìn)行蛋白沉淀，然后取上清液進(jìn)行稀釋，最后用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行檢測，采集質(zhì)譜信號。通過建立已知濃度分析物（標(biāo)準(zhǔn)品）與目標(biāo)分析物響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系，實現(xiàn)對樣本的定量檢測。

三、獲國家藥品監(jiān)督管理局認(rèn)證的臨床質(zhì)譜儀器

（一）國產(chǎn)醫(yī)療器械匯總表

1.四極桿質(zhì)譜：

2.微生物或核酸質(zhì)譜(飛行時間質(zhì)譜）、呼氣質(zhì)譜：

（二）進(jìn)口醫(yī)療器械匯總表

1.四極桿質(zhì)譜：

2.微生物或核酸質(zhì)譜(飛行時間質(zhì)譜）：

四、臨床串聯(lián)質(zhì)譜儀安裝注意事項

實驗室硬件包括水電氣、噪音、廢物、空間，IT和輔助設(shè)施。由于質(zhì)譜用在臨床是近幾年的事，已有的實驗室很可能不能滿足質(zhì)譜的需要。要能保證對儀器和員工提供一個安全、舒適的環(huán)境。所以，在做規(guī)劃時，還要考慮到將來的發(fā)展以及和實驗室其它部門的互動和合作。

1.用電：質(zhì)譜對電的要求較高。電壓要跟儀器匹配（有110伏的，有220伏的），電流要達(dá)到要求，電壓要穩(wěn)（可選穩(wěn)壓器）。最好把儀器（包括質(zhì)譜、色譜、電腦）都接在不間斷電源上。插座也要和儀器的插頭匹配，插座的數(shù)目（16A插座≥3個，10A插座≥6個）要滿足工作需求，且距離不能太遠(yuǎn)。UPS輸出電壓值零線與地線要求小于2V，UPS功率宜根據(jù)儀器使用功率及考慮以后的發(fā)展。另外前期場地改建可以讓儀器供應(yīng)商技術(shù)人員現(xiàn)場勘測并給出改建意見。

2.用氣：質(zhì)譜里常用的氣有氮氣、氦氣和氬氣。其中氮氣用量最大。儀器少的時候可以用氮氣發(fā)生器，儀器數(shù)目多的時候（超過五十臺）最好用中央供氣系統(tǒng)。注意氣體純度和壓力的要求。氬氣用量不大，鋼瓶就可以了。一些特殊的儀器可能會有特殊的氣體要求。比如負(fù)離子檢測可能需要用zero gas。

3.試劑：色譜純級（導(dǎo)電率18.2）以上水（或屈臣氏純凈水）；化學(xué)品試劑甲醇和乙腈宜購買進(jìn)口默克或菲舍爾（質(zhì)譜級）。

4.噪音：質(zhì)譜需要很高的真空。抽真空的泵往往會產(chǎn)生噪音，尤其當(dāng)儀器多的時候。氮氣發(fā)生器也有噪音。最好能做到人機(jī)分離。如果做不到人機(jī)分離，最好能把真空泵和氮氣發(fā)生器放在其他房間。如果這個也做不到，可以在墻上貼一層能吸收噪音的泡沫，或者把泵藏在箱子里，但需要注意的是，真空泵會產(chǎn)生熱，所以注意不要讓箱內(nèi)溫度太高。

臨床質(zhì)譜實驗室平面圖（參考）

5.廢氣：質(zhì)譜儀工作中產(chǎn)生廢氣，需要排到室外。實驗室改造或建造時要預(yù)留通道。

6.廢液：色譜儀會產(chǎn)生廢液，需要有處理廢液的裝置和流程，并把無害的廢液和有害的廢液分開。建方法時也可以試一試對環(huán)境不是那么有害的試劑，比如用乙醇代替甲醇，用乙酸代替甲酸。

7.空間：儀器到貨需要有貨梯和能夠進(jìn)入的實驗室門寬的要求，實驗臺的寬度（≥90cm）和承重（≥500KG）要求。儀器周圍要留有足夠的維修空間（離墻≥50cm）。還要預(yù)留空間（離心機(jī)、通風(fēng)廚、冰箱等）和桌面給樣品的制備和擺放（打印機(jī)，垃圾桶，廢液缸，試劑瓶等）。儀器位置和擺放要合理，盡量減少操作人員來回走路的步數(shù)。如把色譜儀放在質(zhì)譜儀上面。但需要注意漏水和限高。

常規(guī)檢測項目所需購買的輔助設(shè)備清單

8.環(huán)境：質(zhì)譜儀對實驗室溫度、濕度、震動和光線有較高的環(huán)境控制要求才能讓保證儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。實驗室設(shè)計的既要保證儀器的要求，也要滿意員工舒適的工作環(huán)境要求。